NewGene FastX: rapidez, simplicidade e eficiência na obtenção de DNA bacteriano
A obtenção rápida e eficiente do DNA genômico é essencial para o êxito de análises moleculares fundamentadas em PCR. Procedimentos tradicionais, como os baseados em sílica, salting-out e extração com fenol-clorofórmio, são amplamente empregados, porém, exigem múltiplas etapas, consumindo maior tempo e elevando o custo por amostra.
Diante desses desafios, o método baseado no reagente NewGene FastX se destaca por oferecer simplicidade operacional, agilidade na obtenção de DNA e desempenho compatível com os métodos convencionais, representando uma alternativa inovadora e eficiente para laboratórios que desejam otimizar seus fluxos de trabalho sem comprometer a qualidade das análises moleculares, principalmente para rotinas de alta demanda, caso das análises de Salmonella.
O NewGene FastX foi desenvolvido para obtenção rápida de DNA de culturas bacterianas, tanto líquidas quanto sólidas, em poucas etapas. O protocolo consiste em apenas uma centrifugação para concentrar a amostra, seguida de adição de FastX e, após, de lise térmica. Feito isso, o DNA já estará disponível para uso direto no mastermix de PCR, sem necessidade de lavagens, colunas ou outros reagentes. O procedimento simplifica e agiliza consideravelmente o preparo das amostras microbiológicas para PCR.
Vantagens do NewGene FastX
- Ágil: menos de 10 minutos.
- Prático: sem lavagens ou colunas.
- Escalável: ideal para múltiplas amostras.
- Seguro: reagentes não tóxicos.
- Versátil: compatível com diversas bactérias de interesse veterinário, como Salmonella, Clostridium perfringens, Escherichia coli, Actinobacillus pleuropneumoniae e Pasteurella multocida, entre outras.
Desempenho comparável aos métodos tradicionais
Com o objetivo de avaliar a eficácia do FastX, foi conduzido um estudo utilizando amostras clínicas positivas para três espécies bacterianas: Salmonella spp., Pasteurella multocida e Clostridium perfringens, todas previamente enriquecidas em água peptonada overnight. Todas foram submetidas a dois protocolos distintos para obtenção de DNA: (1) o método tradicional de extração baseado em sílica (NewGene Prep + Preamp), representando os kits comerciais de sílica, e (2) o método NewGene FastX. O DNA obtido por ambos os procedimentos foi empregado em reações de PCR em tempo real para detecção de Salmonella spp., C. perfringens e P. multocida, utilizando os kit NewGene SALAmp, CPERAmp e PMAmp, e os valores de CT (threshold cycle) foram comparados.
Os valores de R² próximos de 1,0 indicam uma forte correlação entre os resultados dos dois métodos para todas as espécies testadas. Isso significa que os valores de CT obtidos pelo FastX são equivalentes aos obtidos pelo método tradicional de sílica para essas bactérias.
O método FastX pode ser utilizado como alternativa ao método tradicional de sílica, especialmente em laboratórios que buscam maior agilidade e simplicidade operacional, sem comprometer a precisão dos resultados das análises moleculares.
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